Ultra Nuclease GMP класу
Каталожний номер: HC2016A
UltraNuclease GMP-grade експресується та очищається в Escherichia coli (E.coli) шляхом генетичної інженерії та готується в середовищах GMP.Це може зменшити в'язкість клітинного супернатанту та клітинного лізату в наукових дослідженнях, підвищити ефективність очищення білка та покращити функціональні дослідження білка.Продукт також може зменшити залишки нуклеїнових кислот хазяїна до pg-grade, покращуючи ефективність і безпеку біологічних продуктів для застосування, включаючи очищення вірусів, виробництво вакцин і фармацевтичне виробництво білків/полісахаридів.Крім того, продукт також можна застосовувати для запобігання злипання мононуклеарних клітин периферичної крові людини (PBMC) у клітинній терапії та розробці вакцин.
UltraNuclease надається у формі стерилізованого реагенту, елюованого буфером (20 мМ Tris-HCL рН 8,0, 2 мМ MgCl, 20 мМ NaCl, 50% гліцерин), з виглядом безбарвної прозорої рідини.Цей продукт виробляється відповідно до вимог GMP і надається в рідкій формі.
компоненти
UltraNuclease GMP-grade (250 U/мкл)
Умови зберігання
Продукт поставляється з сухим льодом і може зберігатися при -25 ℃ ~ -15 ° C протягом двох років.
Якщо продукт був відкритий і зберігався при 4℃ більше тижня, ми рекомендуємо фільтруватипродукт для запобігання мікробному забрудненню.
Технічні характеристики
| Хост експресії | Рекомбінантна E. coli з геном UltraNuclease |
| Молекулярна вага | 26,5 кДа |
| такелектрична точка | 6,85 |
| Чистота | ≥99% (SDS-PAGE) |
| Буфер зберігання | 20 мМ Tris-HCL pH 8,0, 2 мМ MgCl, 20 мМ NaCl, 50% гліцерину |
|
Визначення одиниці | Визначення однієї одиниці активності (U) - це кількість ферменту, який використовується длязмінити значення поглинання ΔA260 на 1,0 за 30 хвилин у 2,625 млреакційна система при 37 ℃ з pH 8,0 (еквівалентно повному розщепленню37 мкг ДНК сперми лосося в олігонуклеотиди). |
Інструкції
1. Зразок Колекція
Прилиплі клітини: видаліть середовище, промийте клітини PBS і видаліть супернатант.
Суспензія клітин: зберіть клітини центрифугуванням, промийте клітини PBS, центрифугуйте при 6000об/хв протягом 10 хв, зберіть осад.
Escherichia coli: зберіть бактерії центрифугуванням, один раз промийте PBS, центрифугуйте при 8000об/хв протягом 5 хв, і зберіть осад.
2. Обробка зразка
Обробіть зібрані клітинні осади буфером для лізису у співвідношенні маси (г) до об’єму (мл) 1:(10-20) або механічними чи хімічними методами на льоду або при кімнатній температурі (1 г клітинного осаду містить приблизно
109 клітинок).
3. Лікування ферментами
Додайте 1-5мМ MgCl до реакційної системи та доведіть pH до 8-9.
Додайте UltraNuclease у співвідношенні 250 одиниць, щоб розщепити 1 г клітинних гранул, інкубуйте при 37 ℃ більше 30 хвилин.Перегляньте форму «Рекомендований час реакції», щоб вибратитривалість лікування.
4. Супернатант Колекція
Центрифугувати при 12 000 об/хв протягом 30 хвилин і зібрати супернатант.
Примітка. Якщо розчин кислий або лужний або містить високу концентрацію солі, миючих засобів абоденатуранти, збільште дозу ферменту або відповідно подовжте час лікування.
Рекомендовані умови реакціїдодатки
| Параметр | Оптимальний стан | Ефективний Кондиціонер |
| Mg²+Концентрація | 1-5 мМ | 1-10 мМ |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Температура | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| Концентрація DTT | 0-100 мМ | >0 мМ |
| Концентрація меркаптоетанолу | 0-100 мМ | >0 мМ |
| Концентрація одновалентних катіонів | 0-20 мМ | 0-150 мМ |
| Концентрація фосфатів | 0-10 мМ | 0-100 мМ |
Рекомендовано Реакція час (37℃, 2 mM Mg²+, pH 8,0)
| Кількість UltraNuclease (кінцева концентрація) | Час реакції |
| 0,25 Од/мл | >10 год |
| 2,5 Од/мл | >4 год |
| 25 Од/мл | 30 хв |
Примітки:
Будь ласка, одягайте необхідні ЗІЗ, такі як лабораторний халат і рукавички, щоб забезпечити ваше здоров’я та безпеку!
