Multiplex One Step RT-qPCR Premix
опис
Каталожний номер: HCR5141A
Multiplex One Step RT-qPCR Premix — це мультиплексний набір для кількісної ПЛР на основі РНК як матриці.В експерименті зворотна транскрипція та кількісна ПЛР виконуються в одній реакційній пробірці, що спрощує проведення експерименту та знижує ризик зараження.Унікальний дизайн суміші буфера та ферментів можна використовувати в одностадійній ліофілізованій системі.У наборі використовується термостійка зворотна транскриптаза для ефективного синтезу першого ланцюга кДНК з використанням гарячої ДНК-полімерази Taq для кількісної ампліфікації.Він містить оптимізований реакційний буфер, суміш ферментів тощо, а також додано фактори, які ефективно пригнічують неспецифічну ПЛР-ампліфікацію та підвищують ефективність ампліфікації множинних реакцій КПЦР, що забезпечує кількісну ампліфікацію множинної флуоресценції, забезпечуючи ефективність ампліфікації праймерів.
компоненти
| Ім'я |
| 1. Ліо-буфер |
| 2. Ліо-ферментна суміш |
| 3. Ліопротектор |
Стан транспортуванняіон
A: Ліо-буфер і захисний засіб: -25 ~ -15 ℃, термін придатності 1 рік.
B: Ліо-ферментна суміш, 2-8 ℃, термін придатності 6 місяців.
Інструкція по експлуатації
1. Реакційна система (Візьмемо 25 мкл як приклад)
| компоненти | Об'єм (мкл) | Остаточна концентрація |
| Ліо-буфер | 6 | 1* |
| Ліо-ферментна суміш | 1 | - |
| Ліо-протектор | 8 | - |
| Праймерна суміш (10 мкМ) | 1 | 0,1-1 мкМ |
| Суміш зондів (10 мкМ) | 0,5 | 0,05-0,5 мкМ |
| Шаблон РНК | 5 | - |
| DEPC H2O | До 25 | - |
2. Оптимізований циклічний протокол
1) Стандартний велосипедний протокол
| Стадія реакції | Температура | час | Цикл | |
| 1 | Зворотна транскрипція | 50°Ca | 10 хв | 1 |
| 2 | Початкова денатурація | 95°C | 5 хв | 1 |
| 3 | Реакція посилення | 95°C | 15 сек | 45 циклів |
| 60°Cb | 30 секc |
2) Протокол швидкого циклу
|
| Стадія реакції | Температура | час | Цикл |
| 1 | Зворотна транскрипція | 50°Ca | 2 хв | 1 |
| 2 | Початкова денатурація | 95°C | 2 сек | 1 |
| 3 | Реакція посилення | 95°C | 1 сек |
45 циклів |
| 60°Cb | 13 секc |
Примітка:
a) Зворотний транскрипція: Температура може бути 42°C або 50°C протягом 10-15 хвилин.
b) Реакція посилення: Температура регулюється відповідно до значення Tm розроблених праймерів.
в)Флуоресценція сигнал придбання: Встановіть експериментальну процедуру відповідно до вимогпосібник з приладу.
Технічна інформація/специфікації
| Гарячий старт | Вбудований гарячий старт |
| Спосіб виявлення | Праймер-зонд виявлення |
| Метод ПЛР | Одноетапна RT-qPCR |
| Тип зразка | РНК |
Примітки
1. Цей продукт призначений лише для наукового використання.
2. Будь ласка, одягайте необхідні ЗІЗ, такі як лабораторний халат і рукавички, щоб забезпечити ваше здоров’я та безпеку！
