Bst 2.0 ДНК-полімераза (без гліцерину, високої щільності)
Bst ДНК-полімераза V2 походить від ДНК-полімерази I Bacillus stearothermophilus, яка має активність ДНК-полімерази 5′→3′ і сильну активність заміщення ланцюга, але не має активності екзонуклеази 5′→3′.Bst ДНК-полімераза V2 ідеально підходить для зміщення ланцюгів, ізотермічної ампліфікації LAMP (ізотермічна ампліфікація, опосередкована петлею) і швидкого секвенування.Ця Bst ДНК-полімераза V2 здатна інгібувати активність ДНК-полімерази при кімнатній температурі, так що вона може працювати та реакційна система може бути сформульована при кімнатній температурі, запобігаючи неспецифічній ампліфікації та покращуючи ефективність реакції, і ця версія може бути ліофілізованим.Крім того, він здатний вивільняти свою активність при підвищених температурах, таким чином усуваючи потребу в окремій стадії активації.
компоненти
компонент | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst ДНК-полімераза V2 (без гліцерину) (32U/мкл) | 0,05 мл | 0,25 мл | 2,5 мл |
10×HC Bst V2 буфер | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 3×10 мл |
MgSO4 (100 мМ) | 1,5 мл | 2×1,5 мл | 2×10 мл |
Додатки
1.LAMP ізотермічне посилення
2.Реакція заміщення одного ланцюга ДНК
3.Високе секвенування генів GC
4.Секвенування ДНК нанограммового рівня.
Умови зберігання
Транспортувати при температурі до 0°C і зберігати при -25°C~-15°C.
Визначення одиниці
Одна одиниця визначається як кількість ферменту, який включає 25 нмоль dNTP у нерозчинний у кислоті матеріал за 30 хвилин при 65°C.
Реакція LAMP
компоненти | 25 мклсистема |
10×HC Bst V2 буфер | 2,5 мкл |
MgSO4 (100 мМ) | 1,5 мкл |
dNTP (10 мМ кожен) | 3,5 мкл |
SYTO™ 16 Зелений (25×)a | 1,0 мкл |
Суміш грунтовкиb | 6 мкл |
Bst ДНК-полімераза V2 (без гліцерину) (32 ОД/мкл) | 0,25 мкл |
Шаблон | × мкл |
ddH₂O | До 25 мкл |
Примітки:
1) а.SYTOTM 16 Green (25×): Відповідно до експериментальних потреб, інші барвники можуть бути використані як замінники;
2) б.Праймерна суміш: отримана шляхом змішування 20 мкМ FIP, 20 мкМ BIP, 2,5 мкМ F3, 2,5 мкМ B3, 5 мкМ LF, 5 мкМ LB та інших об’ємів.
Реакція і стан
1 × буфер HC Bst V2, температура інкубації становить від 60°C до 65°C.
Теплова інактивація
80°C, 20 хв.