2×PCR Master Mix (без барвника)
PCR Master Mix — це готовий до використання звичайний попередньо змішаний розчин для ПЛР, що включає ДНК-полімеразу Taq, суміш dNTP MgCl2 та оптимізований буфер.Під час реакції для ампліфікації можна додати лише праймер і матрицю, що значно спрощує етапи роботи експерименту.Цей продукт містить чудові стабілізатори та може зберігатися протягом 3 місяців при 4℃.Продукт ПЛР має виступ 3'-dA і може бути легко клонований у Т-вектор.
Умови зберігання
Продукт слід зберігати при -25 ℃ ~ -15 ℃ протягом двох років.
Технічні характеристики
| Вірність (порівняно з Taq) | 1× |
| Гарячий старт | No |
| Звис | 3′-А |
| Полімераза | Taq ДНК-полімераза |
| Формат реакції | SuperMix або Master Mix |
| Швидкість реакції | Стандартний |
| Тип продукту | Головна суміш ПЛР (2×) |
Інструкції
1.Система реагування
| компоненти | Розмір (мкл) |
| Шаблон ДНК | Підходить |
| Праймер 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
| Праймер 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
| PCR Master Mix | 25 |
| ddH2O | До 50 |
2.Протокол ампліфікації
| Кроки циклу | Температура (°C) | час | Цикли |
| Попередня денатурація | 94 ℃ | 5 хв | 1 |
| Денатурація | 94 ℃ | 30 сек | 35 |
| Відпал | 50-60 ℃ | 30 сек | |
| Розширення | 72 ℃ | 30-60 сек/кб | |
| Остаточне розширення | 72 ℃ | 10 хв | 1 |
Примітки:
1) Використання шаблону: 50-200 нг геномної ДНК;0,1-10 нг плазмідної ДНК.
2) Mg2+концентрація: цей продукт містить 3 мМ MgCl2, придатний для більшості реакцій ПЛР.
3) Температура відпалу: зверніться до теоретичного значення Tm праймерів.Температуру відпалу можна встановити на 2-5 ℃ нижче, ніж теоретичне значення праймера.
4) Час подовження: для молекулярної ідентифікації рекомендується 30 с/кб.Для клонування генів 60сек/кб рекомендовано.
Примітки
1.Для вашої безпеки та здоров’я під час роботи надягайте лабораторні халати та одноразові рукавички.
2.Тільки для дослідницького використання!
