Рназа А
Рибонуклеаза A (РНКаза A) є одноланцюговим поліпептидом, що містить 4 дисульфідні зв'язки з молекулярною масою близько 13,7 кДа.РНКаза A — це ендорібонуклеаза, яка специфічно руйнує одноланцюгову РНК за залишками C і U.Зокрема, розщеплення розпізнає фосфодіефірний зв’язок, утворений 5'-рибозою нуклеотиду та фосфатною групою на 3'-рибозі сусіднього піримідинового нуклеотиду, так що 2,3'-циклічні фосфати гідролізуються до відповідних 3 'нуклеозидні фосфати (наприклад, pG-pG-pC-pA-pG розщеплюється РНКазою А з утворенням pG-pG-pCp і A-PG).РНКаза А найбільш активна в розщепленні одноланцюгової РНК.Рекомендована робоча концентрація 1-100 мкг/мл, сумісна з різними реакційними системами.Низьку концентрацію солі (0-100 мМ NaCl) можна використовувати для розрізання одноланцюгової РНК, дволанцюгової РНК і ланцюгів РНК, утворених гібридизацією РНК-ДНК.
Однак при високій концентрації солі (≥0,3 М) РНКаза А специфічно розщеплює лише одноланцюгову РНК.
РНКаза А найчастіше використовується для видалення РНК під час підготовки плазмідної ДНК або геномної ДНК.Незалежно від того, активна чи ні ДНКаза під час процесу приготування, може легко вплинути на реакцію.Традиційний метод кип'ятіння на водяній бані можна використовувати для інактивації активності ДНКази.Цей продукт не містить ДНКази і протеази, і не потребує термічної обробки перед використанням.Крім того, цей продукт також можна використовувати в експериментах з молекулярної біології, таких як аналіз захисту РНКази та аналіз послідовності РНК.
Умови зберігання
Продукт слід зберігати при температурі від -25 ℃ до 15 ℃ протягом 2 років.
Технічні характеристики
| Зовнішній вигляд | порошок |
| Кількість | 100 мг / 1 г |
| Тип продукту | РНКаза А |
Інструкції
Це один із поширених методів приготування розчину для зберігання РНКази А.Його також можна приготуватиіншими методами відповідно до традиційних методів у лабораторії чи довідковій літературі (наприкладбезпосереднє розчинення в 10 мМ Трис-HCl, pH 7,5 або розчині Трис-NaCl)
1. Використовуйте 10 мМ ацетату натрію (рН 5,2), щоб приготувати 10 мг/мл розчину для зберігання РНКази А.
2. Нагрівання при 100 ℃ протягом 15 хв.
3. Охолодіть до кімнатної температури, додайте 1/10 об’єму 1 М Tris-HCl (рН 7,4), доведіть рН до 7,4 (длянаприклад, додайте 500 мл 10 мг/мл розчину РНКази для зберігання 1 М Tris-HCl, pH7,4).
4. Розфасований при температурі -20 ℃ для зберігання в замороженому стані, який може бути стабільним до 2 років.
[Примітки]:
При кип’ятінні розчину РНКази в нейтральних умовах утворюється осад РНКази;Варіть його при більш низькому pH, і якщо буде випадання осаду, це може спостерігатися, що може бути викликано наявністю білкових домішок.Якщо після кип’ятіння буде виявлено осад, домішки можна видалити за допомогою високошвидкісного центрифугування (13000 об/хв), а потім упакувати для зберігання в заморожуванні.
Примітки
Будь ласка, одягайте необхідні ЗІЗ, такі як лабораторний халат і рукавички, щоб забезпечити ваше здоров’я та безпеку.
