CHO HCP ELISA Kit

Каталожний номер: HCP0032A

Упаковка: 96 т

У цьому аналізі використовується одноетапний імуносорбентний метод ELISA.Зразки, що містять CHOK1 HCP, одночасно реагують з HRP-міченим козячим антитілом проти CHOK1 і антитілом проти CHOK1, нанесеними на планшет для ELISA.

Надіслати запит

Опис продукту

Дата продукту

У цьому аналізі використовується одноетапний імуносорбентний метод ELISA.Зразки, що містять CHOK1 HCP, одночасно реагують з HRP-міченим козячим анти-CHOK1-антитілом і анти-CHOK1-антитілом, нанесеним на планшет для ELISA, утворюючи нарешті сендвіч-комплекс із твердофазного антитіла-HCP-міченого антитіла.Незв’язані антиген-антитіло можна видалити шляхом промивання планшета ELISA.Субстрат ТМВ додають у лунку для достатньої реакції.Розвиток кольору припиняється після додавання стоп-розчину, а ОП або значення поглинання реакційного розчину при 450/650 нм зчитується за допомогою пристрою для зчитування мікропланшетів.Значення OD або значення абсорбції пропорційне вмісту HCP у розчині.З цього можна розрахувати концентрацію HCP у розчині відповідно до стандартної кривої.

Попередній: Набір для визначення генотипу миші HCR2021A

далі: Дволанцюгова РНК (dsRNA) ELISA KIT HCP0033A

застосування

Цей набір використовується для кількісного визначення вмісту залишків білка клітини-господаря CHOK1 у зразках.

Cкомпоненти

S/N	компонент	Концентрація	Умови зберігання
1	Стандарт CHOK1 HCP	0,5 мг/мл	≤–20 ℃
2	Анти-CHO HCP-HRP	0,5 мг/мл	≤–20℃, захищати від світла
3	TMB	NA	2-8℃, захищати від світла
4	20 × PBST 0,05%	NA	2-8 ℃
5	Стоп розчин	NA	RT
6	Пломби мікропланшетів	NA	RT
7	BSA	NA	2-8 ℃
8	Пластини з попереднім покриттям з високою адсорбцією	NA	2-8 ℃

Необхідне обладнання

Витратні матеріали / Обладнання	Виробництво	Каталог
Зчитувач мікропланшетів	Молекулярні пристрої	Spectra Max M5, M5e або еквівалент
Термоміксер	Епендорф	Eppendorf/5355 або еквівалент
Вихровий змішувач	IKA	MS3 Digital або еквівалент

Зберігання та стабільність

1.Транспортувати при -25~-15°C.

2.Умови зберігання наведені в таблиці 1;компоненти 1-2 зберігаються при ≤–20°C, 5-6 зберігаються при КТ, 3、4、7、8 зберігаються при 2-8 ℃;термін дії 12 місяців.

Параметри продукту

1.Чутливість: 1 нг/мл

2.Діапазон виявлення: 3-100 нг/мл

3.Точність: CV всередині аналізу ≤ 10%, CV між аналізами ≤ 15%

4.Охоплення HCP: >80%

5.Специфічність: Цей набір є універсальним, оскільки він специфічно реагує з CHOK1 HCP незалежно від процесу очищення.

Підготовка реагентів

1.PBST 0,05%

Візьміть 15 мл 20×PBST 0,05%, розведеного в ddH₂O, і довели до 300 мл.

2.1,0% BSA

Візьміть 1 г BSA з пляшки та розведіть у 100 мл PBST 0,05%, добре перемішайте до повного розчинення та зберігайте при 2-8°C.Приготований буфер для розведення дійсний протягом 7 днів.Рекомендується готувати в міру необхідності.

3.Розчин для виявлення 2 мкг/мл

Візьміть 48 мкл 0,5 мг/мл анти-CHO HCP-HRP і розведіть у 11952 мкл 1% BSA, щоб отримати кінцеву концентрацію 2 мкг/мл розчину для виявлення.

4.КЯ та підготовка стандартів CHOK1 HCP

трубка Немає.	Оригінал розведення	Концентрація нг/мл	Обсяг мкл	1% BSA Обсяг мкл	загальний обсяг мкл	Остаточний концентрація нг/мл
A	Стандартний	0,5 мг/мл	10	490	500	10 000
B	A	10 000	50	450	500	1000
S1	B	1000	50	450	500	100
S2	S1	100	300	100	400	75
S3	S2	75	200	175	375	40
S4	S3	40	150	350	500	12
S5	S4	12	200	200	400	6
S6	S5	6	200	200	400	3
NC	NA	NA	NA	200	200	0
QC	S1	100	50	200	250	20

Таблиця: Підготовка КЯ та стандартів

Процедура аналізу

1.Підготуйте реагенти, як зазначено в розділі «Приготування реагентів» вище.

2.Візьміть 50 мкл стандартів, зразків і QC (див. таблицю 3) у кожну лунку, потім додайте 100 мкл розчину для виявлення (2 мкг/мл);Накрийте планшет герметиком і помістіть планшет ELISA на термозмішувач.Інкубуйте при 500 об/хв, 25±3℃ протягом 2 годин.

3.Переверніть мікропланшет у раковину та викиньте розчин покриття.Прокапайте 300 мкл PBST 0,05% у кожну лунку, щоб промити планшет ELISA, викинути розчин і повторити промивання 3 рази.Переверніть тарілку на чистий паперовий рушник і обсушіть.

4.Додайте 100 мкл субстрату ТМВ (див. таблицю 1) до кожної лунки, закрийте планшет ELISA та інкубуйте в темряві при 25±3℃ протягом 15 хвилин.

5.Внесіть 100 мкл стоп-розчину в кожну лунку.

6.Виміряйте абсорбцію на довжині хвилі 450/650 нм за допомогою пристрою для зчитування мікропланшетів.

7.Аналізуйте дані за допомогою SoftMax або еквівалентного програмного забезпечення.Побудуйте стандартну криву за допомогою моделі логістичної регресії з чотирма параметрами.

Приклад стандартної кривої

ПРИМІТКА. Якщо концентрація HCP у зразку перевищує верхню межу стандартної кривої, його необхідно належним чином розбавити буфером для розведення перед тестуванням.

ПРИМІТКИ

Стоп-розчин - це 2М сірчана кислота, поводьтеся обережно, щоб уникнути розбризкування!