2×PCR Super Mix (з барвником)
2× PCR Master Mix містить ДНК-полімеразу Taq, dNTP та інші компоненти, необхідні для ПЛР.Майстер-мікс стабільний протягом 3 місяців при 4 ℃ з нашими індивідуальними стабілізаторами.Розчин попередньої суміші оптимізований для звичайної ПЛР і готовий до використання завдяки додаванню матриці ДНК і праймерів.Продукти ПЛР можна завантажувати безпосередньо для електрофорезу з попередньо завантаженим барвником бромфенол синім.Ампліфіковані продукти містять виступи 3'-dA і можуть бути легко клоновані в Т-вектор.2×PCR Master Mix спрощує процедуру ПЛР і зменшує забруднення.
Умови зберігання
Продукти слід зберігати при -25 ℃ ~ -15 ℃ протягом 2 років.
Технічні характеристики
Вірність (порівняно з Taq) | 1× |
Гарячий старт | No |
Звис | 3 '-А |
Полімераза | Taq ДНК-полімераза |
Формат реакції | SuperMix або Master Mix |
Швидкість реакції | Стандартний |
Тип продукту | PCR Master Mix (2x) |
Інструкції
1.Система реагування
компоненти | Обсяг(мкл) |
Шаблон ДНК | Підходить |
Праймер 1 (10 мкмоль/л) | 2 |
Праймер 2 (10 мкмоль/л) | 2 |
2× PCR Master Mix | 25 |
ddH2O | до 50 |
2.Протокол ампліфікації
Кроки циклу | Температура (°C) | час | Цикли |
Початкова денатурація | 94 | 5 хв | 1 |
Денатурація | 94 | 30 сек | 35 |
Відпал | 50-60 | 30 сек | |
Розширення | 72 | 30-60 сек/кб | |
Остаточне розширення | 72 | 10 хв | 1 |
Примітка:
1) Використання шаблону: 50-200 нг геномної ДНК;0,1-10 нг плазмідної ДНК.
2) Mg2+концентрація: цей продукт містить 3 мМ MgCl2, що підходить для більшості реакцій ПЛР.
3) Температура відпалу: зверніться до теоретичного значення Tm праймерів.Температуру відпалу можна встановити на 2-5 ℃ нижче, ніж теоретичне значення праймера.
4) Час подовження: для молекулярної ідентифікації рекомендується 30 с/кб.Для клонування генів рекомендовано 60 с/кб.
Примітки
1.ПЛР-продукти з 2× PCR Master Mix не підходять для електрофорезу в поліакриламідному гелі.
2.Для вашої безпеки та здоров’я під час роботи надягайте лабораторні халати та одноразові рукавички.
3.Він використовується ТІЛЬКИ для дослідницького використання!