Лужна фосфатаза (ALP)
опис
Лужна фосфатаза отримана з рекомбінантного штаму E. coli, який несе ген TAB5.Фермент каталізує дефосфорилювання 5' і 3' кінців фосфомоноефірів ДНК і РНК.Крім того, він гідролізує рибозу, а також дезоксирибонуклеозидтрифосфати (NTP і dNTP).Лужна фосфатаза TAB5 діє на 5' виступаючі, 5' заглиблені та тупі кінці.Фосфатазу можна використовувати в багатьох додатках молекулярної біології, таких як клонування або мічення кінців зонда для видалення фосфорильованих кінців ДНК або РНК.В експериментах з клонування дефосфорилювання запобігає самолігування лінеаризованої плазмідної ДНК.Він також може руйнувати невключені dNTP в реакціях ПЛР, щоб підготувати шаблон для секвенування ДНК.Фермент повністю і необоротно інактивується шляхом нагрівання при 70°C протягом 5 хвилин, що робить непотрібним видалення фосфатази перед лігуванням або кінцевим міченням.
Використання
1. Лужна фосфатаза, пов’язана з білками (антитілами, стрептавідином тощо), може специфічно ідентифікувати цільові молекули та може використовуватися в ELISA, WB та гістохімічному виявленні;
2. Лужна фосфатаза може бути використана для дефосфоризації 5'-терміналу ДНК або РНК, щоб запобігти самозв'язуванню;
3. Вищевказані дефосфорильовані ДНК або РНК можуть бути помічені радіоактивно міченими фосфатами (через полінуклеотидкіназу Т4)
Хімічна структура
Специфікація
Тестові елементи | Технічні характеристики |
Активність ферменту | 5 ОД/мкл |
Ендонуклеазна активність | Не виявлено |
Активність екзонуклеази | Не виявлено |
Нікінгова діяльність | Не виявлено |
Активність РНКази | Не виявлено |
ДНК E.coli | ≤1 копія/5U |
Ендотоксин | LAL-тест, ≤10EU/мг |
Чистота | ≥95% |
Транспортування та зберігання
Транспорт:Ambient
Зберігання:Зберігати при 2-8°C
Рекомендований повторний тестжиття:2 роки